反向遗传操作技术平台

反向遗传操作技术(reverse genetics)是指通过构建病毒感染性分子克隆,在病毒cDNA分子水平上进行体外人工改造来研究病毒的生物学功能,已称“病毒拯救”。建立病毒反向遗传操作系统主要包括基因组全长cDNA克隆及改造(如进行基因突变、缺失、插入等)、辅助质粒的构建、共转染拯救病毒粒子和鉴定新生病毒与应用等内容。以此来研究病毒的基因功能与宿主间的相互作用关系、构建新型病毒载体及新疫苗研制。海隆生物技术团队拥有丰富的RNA病毒拯救经验和服务平台,为客户提供优质服务

基因工程亚单位疫苗蛋白生产平台
原核表达系统

大肠杆菌表达是最早用于表达重组蛋白的宿主菌。其遗传背景清晰,生产过程安全可控,在蛋白表达的各个系统中,是最主要的工具。其增殖时间较短、纯化方便、稳定性好,使得评估重组蛋白在大肠杆菌的表达时,仅需要1~2周时间。相较于其他表达系统,大肠杆菌工程菌对重组蛋白的表达水平更高,其中胞质表达的重组蛋白产量通常可占到总蛋白量的30%。而大肠杆菌培养基的组成简单价格低廉,使大规模生产过程简便易行。海隆生物技术团队有丰富的大肠杆菌系统蛋白表达经验。针对于有些外源基因在大肠杆菌中重组表达会形成膜包裹的高密度、不溶性蛋白质的包涵体的情况,我们会进行表达系统优化,尽量降低形成包涵体的几率。同时我们会通过评估确定最佳的复性条件,进行温和的包涵体変复性。我们提供的复性蛋白纯度在95%以上。

杆状病毒表达系统

杆状病毒表达系统(baculovirus expression vector system, BEVS)自1983年问世以来广泛应用于各种重组蛋白的生产。其表达的外源蛋白在细胞内进行正确折叠及翻译后加工修饰(包括糖基化、磷酸化、酰基化等),表达的重组蛋白具有完整的生物学功能。能很好的保证用于制作疫苗的蛋白的免疫原性。此外昆虫细胞悬浮生长,容易放大培养,有利于大规模表达重组蛋白。海隆生物提供快速、高效、经济的昆虫杆状病毒表达系统重组蛋白生产。我们的技术人员拥有丰富的昆虫杆状病毒表达重组蛋白的经验,特别是针对于对细胞有毒性的病毒蛋白有丰富的表达经验。我们的技术人员会根据蛋白的具体性质优化在昆虫杆状病毒表达系统中的产量,提高蛋白的表达量。

哺乳动物细胞表达系统

哺乳动物细胞表达系统能够为重组蛋白提供最接近于天然状态的翻译后修饰,在蛋白表达过程中会形成接近天然蛋白的蛋白质折叠和聚合,具备活性蛋白所必须的空间结构和修饰。在活性方面远胜于原核表达系统及酵母、昆虫细胞等真核表达系统,更接近于天然蛋白质。这一特性使得哺乳动物细胞表达系统在重组蛋白,特别是糖基化的病毒囊膜蛋白的研发和生产中具有重要意义。海隆生物哺乳动物细胞蛋白表达技术团队拥有丰富的CHO及HEK293细胞表达经验,其成熟的哺乳动物蛋白表达系统及纯化服务平台,提供哺乳动物蛋白表达系统的表达、纯化及疫苗制备服务。